dapi溶液怎么配置(dapi溶剂)

在生活中，很多人可能想了解和弄清楚DAPI（溶液配制，使用方法，步骤）的相关问题？那么关于dapi溶液怎么配置的答案我来给大家详细解答下。

DAPI溶液配制以及DAPI溶液使用方法：

​1. DAPI 产品介绍：

DAPI (28718-90-3,DAPI Dihydrochloride)是一种荧光 DNA 染料，可与双链 DNA 的小沟结合，优先选择富含腺嘌呤和胸腺嘧啶 (AT) 的 DNA。 DAPI 常用于显微镜和流式细胞术。 DAPI 可用于固定细胞或活细胞，尽管它在活细胞中的跨膜效率较低并且需要使用更高的浓度。采用DAPI配制 DAPI染色液：浓度为5 mg/ml，推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。

备注：DAPI溶解度

DMF: 0.2 mg/ml

DMSO: 3 mg/ml

Ethanol: 0.2 mg/ml

2. DAPI溶液一般使用：ddH2O配制，溶液的浓度为 5mg/ml，推荐DAPI溶液工作浓度为0.5-10μg/ml之间。DAPI，也被称为：DAPI dihydrochloride，DAPI是一种可穿透细胞膜的蓝色荧光染料，与双链DNA进行结合以后，可产生比 DAPI 自身强超过20倍的荧光。与传统的 EB (溴化乙锭，ethidium bromide)进行比较，DAPI 对双链DNA 的染色灵敏度要比EB的染色灵敏度高很多倍。因 DAPI 是含有特定 AT序列DNA 的一种嵌入剂，DAPI 可以像 Hoechst染料 一样粘附在DNA双螺旋的小沟区上。

虽然 DAPI 不能通过活细胞膜，但 DAPI 可以穿透扰乱的细胞膜而对核进行染色。DAPI 具有较高的光漂白承受能力，可以用于检测 酵母线粒体DNA，病毒DNA，叶绿体DNA，microplasm DNA 及 染色体DNA。DAPI与DNA偶联物的激发和发射波长分别为：360nm/460nm。

DAPI染色实验经常应用于细胞凋亡检测，流式细胞仪检测以及染色后用荧光显微镜观察等。当然 DAPI 也用于普通 细胞核染色 及特定情况下双链DNA的染色使用。

3. DAPI 结构式:

4. DAPI溶液 使用步骤：

a. 取1mg的DAPI粉末，离心使粉末沉积在保存管底，后取1mL 的ddH2O将 DAPI粉末溶解，可以制备出 2.9mM的DAPI溶液（1mgDAPI/1mL H2O）。 备注：※ 不使用的制备液需要按照每次试验需求量分装存储，以免反复冻融对试剂活性造成影响；

※ DAPI 不可以用 PBS缓冲溶液或者其他缓冲液直接进行溶解，需要先用水将其溶解。

b. 取需要量的 DAPI溶液 加入 PBS缓冲液中，制得 10~50µM的 DAPI溶液。

※ 可选择采用以下方法配制 PBS缓冲液： 称取：8.00g NaCl，0.20g KCl，0.2g KH2PO4以及2.9g Na2HPO4·12H2O，溶于1L纯水中制得。

c. 量取 1/10培养基体积 的 DAPI溶液 加至细胞培养基里，当然也可采取 1/10浓度 的 DAPI缓冲液 替代培养基。

d. 在37℃恒温条件下，培养细胞约10~20分钟，可根据实验调节培养时间。

e. 之后再用 PBS缓冲液 或其他 适合的缓冲液 对细胞清洗2-3次。

f. 最后使用荧光显微镜进行观察细胞，荧光显微镜需带有 360nm激

发波长和460nm发射波长的滤光片的。

温馨提示：通过以上关于DAPI（溶液配制，使用方法，步骤）内容介绍后，相信大家有新的了解，更希望可以对你有所帮助。