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生物选修1纯化蛋白质的方法(蛋白纯化三部曲)

导语:生物菜鸟纯化蛋白进阶篇

蛋白质的分离纯化在生物化学研究应用中使用广泛,是一项重要的操作技术。当细胞转染完成后常常需要对转染后的细胞产物进行纯化。比较常用的有很多,比如根据溶解度差别,电荷不同,分子大小,颗粒吸附力的强弱,配体特性等进行分离。而用的比较多的是根据配体特性进行分离。该方法又叫亲和层析其原理是利用蛋白质分子与另一种称为配体的分子能够特异性结合的性质进行分离纯化蛋白。该方法纯化过程简单、迅速 ,分离效率高,实验条件温和。

配基应具备的特性:1.对于欲纯化的生物物质应具有专一亲和。 2.必须具备能被修饰的功能基团。

基质应具备的特性:1.惰性的,非专一性吸附无或足够小。2.有丰富的可供活化的化学基团,并在温和条件下能与配基共价结合3.良好的机械性能,具有好的液体流动性。4.有较好的物理和化学稳定性。 5.多孔网状结构。

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