金耳菌如何储存(金耳菌种生产技术方法)

导语：金耳的栽培，有效优良菌种的低温整体保藏法，你知道多少？

我们今天来说说金耳的有效优良菌种的低温整体保藏法，希望大家能够喜欢！前面重点介绍了金耳有效优良原种的种耳继代复制选优法。虽然这种方法是当前金耳选育和保藏良种的一种最理想的方法，但是，鉴于金耳人工栽培技术目前尚未全面推广，新开发地区，中小批量的生产试种，采用这种方法还不具备生产规模和技术条件。

因此，选用金耳有效优良菌种的低温整体保藏法，比较适宜，待具备生产规模和技术条件后，再采用前面介绍的第一种方法，大批量选育和保藏。根据1983～1993年的重复验证，低温保藏琼脂斜面试管和三角瓶平板母种，整体保藏代用培养料制作的菌瓶有效优良原种和新鲜、自然风干的金耳子实体，以短期保藏为宜。这种方法只能作为向第一种方法过渡的辅助手段，长期保藏，则保藏时间越长，效果越差。供试菌种:为1983～1993年的瓶栽金耳和1983～1985年采集的野生和段木栽培金耳。

实验方法:先采用小口径(1.5～2厘米)试管制作常规的琼脂斜面母种，后采用大口径(3厘米)试管和100～150毫升的三角瓶，制作20～30毫升的琼脂培养基小斜面和厚平板母种。小口径试管的分离物，为黄豆粒大小的金耳子实体组织块，大口径试管和三角瓶平板表面的分离物，为1～1.5立方厘米的金耳子实体组织块。为了控制毛韧革菌菌丝体的旺盛生长，在大试管小斜面和三角瓶平板上适当多投入几个耳块，耳块间隔距离适当，以利于耳块正常生长和取耳转瓶使用。处理:将在无菌条件下分离好的试管和三角瓶，统一放入25℃恒温箱内培养，一部分放入18℃～23℃±3℃培养室内培养，作对照处理。

待菌丝体长满试管斜面和三角瓶平板时，先按母种的分级标准，进行直观和显微镜鉴定归类后期已积累了经验，用肉眼直观鉴定即可。属于有效和有效优良的母种试管和三角瓶，再统一放入0℃～4℃低温冰箱内保藏继代复制的有效优良原种菌瓶和鲜、干的金耳子实体样品，也统一放入0℃～4℃的冰箱内保藏备用。

(1) 有效优良母种的保藏及存活力测试：将上述统一保藏在低温冰箱内的金耳有效优良母种斜面和三角瓶平板，每隔30天，随机取出大小试管种各10支，三角瓶平板种各3瓶，在无菌条件下转管、转三角瓶活化菌种，培养基除采用一号PDA加3％麦粒煎汁培养基外，另增补含氮源较高的二号PDA加0.5％蛋白胨培养基相对比，管、转瓶后，再将两组试管种和两组三角瓶平板母种，统一放入25℃温箱和18℃23℃±3℃干培养室内培养。

直到9月底最后一次测试，虽然各组的菌种成活率仍然高达100％，但是，将以上各组的活化菌种，按常规方法采用阔叶木屑和棉籽为主料的代用培养基转接原种、再接栽培种。另用新制备的同类母种接原种和栽培种作对照。菌种出耳率、耳质却有较大的差异。试验表明各处理组，经过9个月的0℃～4℃低温冰箱保藏，测试菌种的成活率，虽然都能达到100％，但是，经过转瓶制作原种，用新分离制作的母种种耳作对照，处理组的出耳率，普遍都低于对照组。从培养性状上看，处理组的菌丝体色泽、子实体的色泽和丰满程度、耳质和个体大小，都不如对照组优良，室温条件下培养的又较25℃恒温箱内培养的综合性状较好。

在0℃～4℃冰箱内保藏9个月的耳块母种，在含氮源较高的二号培养基上活化，获得的第一代耳块母种，再经过5～8次的转管传代，分别保藏在同样的低温冰箱内;1年后转管接原种瓶，菌丝体生长十分细弱而缓慢，很容易受各种霉菌污染报废。而正常生长发育的继代复制母种转接原种，经无数次的转接传代，种性基本正常。

这充分说明，采用低温整体保藏金耳母种，保藏期不宜太长，以不超过半年为宜。试验结果表明处理组由于菌种生活力很弱，除少数菌瓶勉强形成有效菌种外，大部分都经受不住各种霉菌的感染，污染报废，勉强形成有效菌种的菌瓶也没有实用价值，而对照组却获得了较高的有效率和出耳率这进一步说明，低温整体保藏的耳块母种，保藏期不宜太长。一般来说，随着保藏期的延长，菌种生活力逐渐下降，最后明显下降。金耳的有效优良菌种的低温整体保藏法我么你今天就说到这里了，谢谢大家的观看！

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