食用菌杂交子的鉴定可以用什么方法进行优化(如何辨别食用菌栽培中出现的杂菌)

导语：食用菌杂交子的鉴定可以用什么方法进行？优良杂交子的筛选方法？

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一、杂交子的鉴定

对异宗结合的食用菌而言，单孢萌发的菌丝体没有锁状联合结构，通常也不能形成正常的子实体。当2个可亲和的单核菌丝相互交配之后，能形成异核的双核菌丝，这种双核菌丝在显微镜下常可以看到锁状联合结构，并能正常结实。同宗结合食用菌具有自交可孕的特性，双核菌丝没有锁状联合的结构，不能依据锁状联合结构有无来鉴别杂交子真伪。一般而言，属于次级同宗结合的双孢蘑菇每个担子上着生2个担孢子，1个担孢子含有2个不同的细胞核，但极少数担子上着生3个或4个担孢子。1个担子上产生4个担孢子时，意味着它们萌发的菌丝可能都是同核体，可以利用单核担孢子萌发的同核体菌丝进行杂交育种。

食用菌栽培

当1个担子上着生3个担孢子时，其中1个担孢子为双核，另外2个担孢子为单核，双核的担孢子萌发后形成异核体菌丝，单核担孢子萌发后形成同核体菌丝，而同核体菌丝可以用于杂交育种。由于双孢蘑菇同核体菌丝生长速度通常较异核体菌丝生长慢，且同核体菌丝无法结实，可以通过菌落形态和栽培试验鉴别真正的杂交子。但对于双核担孢子萌发的菌丝，只能通过原生质体再生分离鉴定再生同核体，才能进一步进行杂交育种。

双孢蘑菇栽培

对于食用菌杂交子鉴定而言，仅观察锁状联合有无或菌丝生长情况鉴定杂交子是不够的。但结实周期太长，在杂交子鉴定中难以应用。某些异宗结合担子菌的双核体菌丝锁状联合不明显或者较稀少，显微镜下难以观察。因此，常采用拮抗试验、酯酶同工酶酶谱和DNA分子标记技术进行杂交子鉴定。拮抗试验是基于食用菌菌丝体细胞不亲和性的特性，观察杂交子与2个杂交亲本菌株菌落之间是否产生拮抗反应，但某些食用菌体细胞不亲和反应并不明显。双孢蘑菇、黑木耳等食用菌酯酶同工酶酶带比较稳定，在杂交子鉴定中应用效果较好，但在许多食用菌中酶谱稳定性较差。

黑木耳栽培

分子标记技术在杂交子鉴定中应用日益普遍，随着分子生物学技术的发展，杂交子鉴定可以通过特异性引物扩增进行分子指纹鉴定原生质体融合育种一般用于同宗结合食用菌或者远缘杂交育种中，但首先必须对亲本加以特殊的遗传标记，才能利用遗传标记鉴定杂交子。常用的遗传标记为营养缺陷型标记和抗药性标记，也可以采用荧光标记、同工酶标记或DNA分子标记。例如，采用抗药性标记筛选鉴定杂交子时，如果一个亲本对药物A敏感而对药物B不敏感，而另一亲本对药物B敏感而对药物A不敏感，当一定浓度的A、B2种药物同时加到培养基中之后，亲本的原生质体细胞会被药物杀死，但融合子因同时具有两种药物的抗性，因而能够存活下来。

食用菌栽培

食用菌原生质体融合技术还存在许多问题，如亲本标记非常困难、融合子难以鉴定或极不稳定、远源杂交的融合子难以形成子实体或子实体缺乏所期望的优良性状等。原生质体融合机制、融合子细胞核行为和融合子遗传稳定性等方面缺乏深入系统的研究，但原生质体技术在细胞壁合成机制、遗传转化体系构建及诱变育种等方面都有着广泛的应用前景。

食用菌栽培

二、优良杂交子的筛选

获得一定数量的杂交子之后，必须经过初筛和复筛，再进行多年多点的示范性栽培，检验杂交子的丰产性、抗逆性和稳定性，最后才能在生产中应用推广。首先将大量经过初步鉴定的杂交子菌株在栽培料中培养，观察菌丝定植能力和吃料速度，淘汰无法定植或生长速度非常缓慢的杂交子，然后进入初筛试验。在初筛试验中，从吃料能力、抗杂性、出菇期、菇蕾数量、菇形、产量和商品性状等方面对杂交子进行综合考核，筛选出表现较好的杂交子进入下一轮复筛试验。对复筛获得的杂交子，需要进一步扩大栽培规模，并选择不同的地域或生产者进行示范性栽培，明确杂交子适宜栽培范围和优缺点。对于通过了初筛、复筛和示范性栽培的杂交子，最好进一步对杂交子真实性进行再检验，确定其特异性。一般而言，任何一个杂交子适宜的栽培方式和区域都是有限的，必须经过试验和示范，才能逐步明确其适宜推广区域及栽培方式，切忌盲目推广。

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