细胞培养瓶在细胞传代中的应用有哪些(细胞培养瓶在细胞传代中的应用论文)

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细胞培养瓶根据形状的不同有直颈、斜颈、角度颈、三角形、矩形等种类，规格包括25ml、75ml、175ml、250ml，其中小规格的多用于细胞传代、保存细胞、为实验提供细胞等用途。

细胞培养瓶

细胞在细胞培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代（再培养）。传代培养也是一种将细胞保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮性细胞直接分瓶就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。具体操作步骤如下：

10层细胞工厂

将长满细胞的细胞培养瓶中原来的培养液弃去。加入0.5—1ml 0.25％胰酶溶液，使瓶底细胞都浸入溶液中。瓶口塞好橡皮塞，放在倒置镜下观察细胞。随着时间的推移，原贴壁的细胞逐渐趋于圆形，在还未漂起时将胰酶弃去，加入10ml培养液终止消化。观察消化也可以用肉眼，当见到瓶底发白并出现细针孔空隙时终止消化。一般室温消化时间约为1—3分钟。用吸管将贴壁的细胞吹打成悬液，分到另外两到三瓶中，实践培养液塞好橡皮塞，置37℃下继续培养。第二天观察贴壁生长情况。

悬浮细胞培养摇瓶

以上是细胞培养瓶在细胞传代中的应用，消化液的配制方法如下：称取0.25克胰酶蛋白酶（活力为1：250），加入100ml无Ca2+、Mg2+的Hank’s液溶解，滤器过滤除菌，4℃保存，用前可在37℃下回温。胰酶溶液中也可加入EDTA，使最终浓度达0.02％。

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