固体菌种生产工艺(固体菌种的优缺点)
导语:固体菌种生产方法可以分为哪些步骤?每个步骤分别需要注意什么?
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一、母种扩繁母种培养基必须经过严格的灭菌处理方可使用,母种扩繁须在严格无菌的条件下操作。原始母种数量有限,一般允许转接3~4次,均称继代母种。母种扩大培养时,一次培养一批,每次使用其中一部分,其余的保藏备用。应避免多次转管降低菌种生活力,同时防止杂菌污染,以保证菌种纯度。转接前必须对母种进行认真检查,不能有任何污染,否则应弃去不用。在酒精灯火焰旁,用接种钩或接种铲将母种斜面分成若干小块,取一块迅速移入新的试管斜面中部,塞上棉塞。1支母种可扩接30~50支继代母种,通常母种经10d左右可长满培养基,然后用于进一步扩繁,或置于2~4℃冰箱中冷藏备用。
在白色背景上的牡蛎蘑菇
二、原种制作原种由母种扩大繁殖而成,可用于制作栽培种,也可直接用于接种栽培袋。原种制备多使用罐头瓶或专用菌种瓶作为容器。罐头瓶多采用两层报纸和一层聚丙烯塑料膜封口,专用菌种瓶采用能满足滤菌和透气要求的无棉塑料盖封口。原种培养基常以棉子壳、木屑、谷粒、粪草等天然物质为主料,以麸皮、玉米粉、白糖及石膏等作为辅料。原种培养基配方较多,不同食用菌种类应选择不同的配方。通常分解木质素能力强的种类多采用木屑培养基,如香菇、黑木耳等;分解纤维素能力强的种类多采用棉籽壳培养基;而草腐型食用菌以粪草料培养基为好。
盘子上的香菇
制备棉籽壳或木屑培养基时,先将蔗糖、石膏粉等水溶性辅料溶于水,倒入混合好的其他原料中,充分搅拌均匀,堆闷2h左右,即可备用。此时用手紧握培养料,指缝间有水渗出而不下滴为宜。配制各种谷粒培养基时,需要先用清水冲洗,再浸泡,小麦、大麦、燕麦等谷粒需浸泡12h左右,稻谷需浸泡2~3h,玉米粒需浸泡40h左右。然后在锅中加水,超过谷粒表面,水煮开锅后,小火再煮5~30min,使谷粒充分煮透,外观胀而不破、切开后无白心即可。清水冲洗冷却,沥去谷粒表面水分,最后加入其他物质,充分搅拌均匀备用。
食用菌栽培
培养基装瓶时,应松紧适度,料面平整,擦净瓶口内外壁。制备棉籽壳和木屑培养基时,用直径1.5~2cm的锥形木棒,在瓶中央插孔至瓶底。采用罐头瓶做容器的,可用2层报纸和1层塑料膜封口采用高压蒸汽灭菌,灭菌压力为0.14MPa,灭菌时间为1.5~2h,但谷粒培养基需延长至2.5~3h接种可在接种箱、接种室内或超净工作台上进行,每支母种可扩接原种4~6瓶。原种培养期间,定期检查杂菌发生情况,发现污染原种应立即淘汰,并隔离污染源。多数食用菌40d左右可长满瓶谷粒菌种20d左右可长满瓶。菌丝长满后,再继续培养3~5d,使其充分积累营养。原种应尽快使用也可置于低温、干燥、避光环境中短期保存。
食用菌栽培
三、栽培种制作原种可以转接到相同或相似培养基上,扩大培养成为栽培种,直接应用于接种栽培料。栽培种使用量大,不宜长期保存,必须根据生产季节和生产规模周密计划制种时间和数量。(一)原料与配方:其可与原种培养基配方完全相同,也可以适当增加主料、减少辅料。由于栽培种需求量大,需原材料也多,为便于就地取材,降低成本,应考虑当地资源情况。栽培种还可以制成枝条种,枝条种适用于分解木质素能力较强的木腐菌栽培。利用枝条种栽培时,菌种损伤小,萌发快,接种污染率低,接种效率高,扩繁指数高,发菌时间短。(二)常用容器:可使用与原种相同的容器,如玻璃瓶、专用菌种瓶。由于栽培种数量大,生产上普遍采用塑料袋作为容器,常用菌种袋规格为折幅15~17cm、长32~40cm的高压聚丙烯塑料袋或常压聚乙烯塑料袋。较短的料袋一端开口,每袋装干料250~300g较长的料袋两端开口,每袋装干料500g左右。
瓶子里的食用菌
(三)枝条种制作:制作枝条菌种宜选用木纹正直、质地疏松的阔叶树如泡桐、杨树、枫杨等的树杆及枝桠材作为材料,也可以采用一次性筷子或冰糕棍进行生产,还可选用紫穗槐条、荆条、竹条及栎木枝条等。枝条直径通常为3~10mm,长2~18cm。制种前先将枝条浸泡,注意枝条要全部没入水中浸泡12~36h,直到枝条完全泡透。再加入2%生石灰搅匀,以调节酸碱度,然后将枝条捞出、沥千水分备用。也可将枝条用2%的石灰水浸泡24h再用1%蔗糖水煮沸30min,以枝条内含水量52%~55%为宜。
平菇栽培
将各种辅料混合均匀,填充枝条间隙,补充营养,以利于菌丝生长。培养基松紧应适宜,为了防止扎破菌种袋,可先向菌种袋中装入0.5~1cm厚的辅料,再整齐装入以枝条为主的培养基,最后于表面覆盖0.5~1cm厚的辅料,封口。塑料袋封口方法有两种:一是在袋口套颈圈,将塑料膜翻下来,塞上棉塞,包上包头纸,或直接封无棉塑料盖;二是直接用绳绑紧,尽量排除袋内的多余空气,防止灭菌时胀袋及灭菌后冷空气进入。灭菌之后,在无菌条件下进行接种,每瓶原种可扩接约50瓶或20袋栽培种。枝条培养基通透性好,菌丝生长迅速,长满后经7~10d的后熟期使用最好。
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