藻类计数检测方法(藻类植物观察实验的实验原理)
导语:藻类观察、计数和鉴定——万融实验
一、目的要求
对水体浮游藻类进行形态观察,统计藻类数量;鉴定优势种;初步了解样品中藻类种群的结构。
二、基本原理
血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有4条槽而构成3个平台。中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各有一个计数区,计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
计数时如采用16个大方格的计数板,要按对角线方位,取左上、左下、右上、右下的4个大方格(即100小方格)的藻数。如果是25大方格计数板,除数上述四格外,还需数中央1大方格的藻数(即80小方格)。
计数区边长为1mm,则计数区的面积为1mm2,每个小方格的面积为1/400mm2。盖上盖玻片后,计数区的高度为0.1mm,所以每个计数区的体积为0.1mm3,每个小方格的体积为1/4000mm3。
使用血球计数板计数时,先要测定每个小方格中藻类的数量,再换算成每毫升菌液(或每克样品)中藻类的数量。
每毫升水样中含有细胞数=每个小格中藻类平均数(N)×4000÷水样浓缩倍数(d)。
三、器材
显微镜、血球计数板、沉降筒。
四、操作步骤
(1)采集水样1L,加入15ml鲁哥氏液固定,水样摇匀带回实验室。
(2)置1L圆柱形沉降筒中静沉24~36小时后,用虹吸管小心吸出上清液,将剩下的20~25ml浓缩液摇匀,移入30ml定量标本瓶中,然后用吸出的上清液少许冲洗沉降筒,移入上述30ml的定量标本瓶中定容。
(3)将浓缩样摇匀,取0.1ml于计数框中,小心盖上盖玻片,置10×40倍显微镜下对各种藻类计数。
(4)显微镜下对优势藻类进行绘图。
(5)依据《中国淡水藻类》鉴定优势藻类种属。
思考题
1.绘制出观察到的2~3种藻。
2.对绘出的藻种进行鉴定。
3.统计出水样中藻类密度。
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