需氧芽孢杆菌有哪些(需氧芽孢菌落形态)
导语:需氧芽胞杆菌——万融实验
本属为一群革兰阳性产生芽胞的较大杆菌,需氧或兼性厌氧。唯炭疽杆菌对人或动物都有很强的致病性,其他均为非致病菌(如枯草杆菌等)。由于这类细菌形态和培养性状与炭疽杆菌相似,故统称为类炭疽杆菌。
一、炭疽杆菌和枯草杆菌的生物学特性
【实验材料与仪器】
1. 炭疽杆菌感染动物组织涂片革兰染色标本片。
2. 枯草杆菌革兰染色标本片。
3. 炭疽杆菌和枯草杆菌血琼脂平板培养物。
4. 炭疽杆菌及枯草杆菌半固体培养基培养物。
5. 普通光学显微镜、镜油、擦镜纸。
【实验方法】
1.取炭疽杆菌及枯草杆菌革兰染色标本片,置显微镜下观察其形态与染色性,注意两种细菌形态、结构、排列及染色性的异同。
2.观察炭疽杆菌和枯草杆菌在血琼脂平板上菌落形态及溶血性的异同。
3.观察炭疽杆菌和枯草杆菌于半固体培养基中的生长情况,注意有无动力。
【实验结果】
1.炭疽杆菌为致病菌中菌体最大者,单个存在或几个相连成短链,菌体相连处有清晰的间隙,如竹节状,菌体周围有荚膜,革兰染色阳性。枯草杆菌较炭疽杆菌短小,两端钝圆,单个存在或呈短链,革兰染色阳性,有芽胞形成。
2.炭疽杆菌菌落灰白,不透明,大而扁平,表面粗糙,边缘不整齐,菌落周围一般无溶血环。枯草杆菌菌落较大,灰白色,稍隆起,表面粗糙,边缘不整齐,菌落周围有明显的溶血环。
3.在半固体培养基中,炭疽杆菌无鞭毛,不能运动,故沿穿刺线生长;枯草杆菌有鞭毛,能运动,故自穿刺线向四周扩散生长。
二、炭疽杆菌串珠实验
【实验原理】炭疽杆菌的幼龄培养物常呈链状排列,在含有低浓度青霉素(0.05~0.5U/ml)的培养基中,可以发生形态变异;由于细胞壁的合成被抑制,菌体内部渗透压高,菌体膨胀为圆球形,并相连成串珠状,而其他需氧芽胞杆菌则不出现这种现象,具有较大的鉴别意义。
【实验材料与仪器】
1.菌种:炭疽杆菌。
2.普通琼脂培养基、牛肉汤培养基、青霉素、平皿、温箱、显微镜等。
【实验方法】
琼脂薄片法
1.取普通琼脂加热融化,按每毫升0.05~0.5U加入青霉素,充分摇匀,倒入无菌平皿,其厚度为1mm左右。
2.凝固后,用消毒小刀切成盖玻片大小的方块,平放在洁净无菌载玻片上。
3.炭疽杆菌新鲜琼脂斜面培养物接种于牛肉汤内,37℃培养6h左右并振匀,取一接种环培养物接种于琼脂小方块上,放平皿中,皿内放一小团湿棉球,盖上皿盖。
4.37℃温箱作用2~4h,取出盖上玻片,用低倍或高倍镜检查。
【实验结果】
炭疽杆菌菌体膨胀为圆球形,并相连成串珠状,为阳性反应。
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