卵黄抗体的制备方法和过程(卵黄抗体的制作过程)

导语：抗体解读系列2：精制卵黄抗体如何制备？

为什么要制备精制卵黄抗体？

1、家禽病毒病是没有特效药物的，紧急接种产生抗体来不及。

2、使用抗血清是一种很好的方法，但抗血清的价格昂贵。

3、实践证明制备高免卵黄抗体，并收到了良好的防治效果。

如何制备卵黄抗体？

动物的选择

同制备抗血清的要求一样必须选择健康无病的产前或开产鸡（鸭）群。

疫苗的选择

很重要→获得高效价抗体的关键通常选择免疫原性优良的油乳剂疫苗。

免疫程序

至少免疫2次以上。

抗体监测与高免蛋的收集

1、最后一次免疫后，测定卵黄中的抗体水平；

2、在抗体效价达到企业内控标准时，开始收集高免蛋，一般高免蛋合格时间大约可持续1个月；

3、抗体效价降低到企业内控标准时停止收蛋，并根据情况再进行1次加强免疫。

卵黄液的收集与处理

1、收取卵黄液前，必须对鸡蛋进行清洗消毒。

2、打开鸡蛋去除蛋清，分离蛋黄，卵黄液的主要成分包括50%的水、30%的脂肪和20%的蛋白质，大多数蛋白质与脂肪结合以脂蛋白的形式存在，脂蛋白难溶于水，溶于水的蛋白质包括α蛋白、β蛋白和γ蛋白，其中卵黄免疫球蛋白属于γ蛋白，是溶于水的（那红等，1997）。

3、检测的抗体效价，加入灭菌生理盐水进行稀释（稀释后的抗体效价不低于企业内控标准），粗提取卵黄免疫球蛋白，去除卵黄中的非水溶性成分。

4、硫酸铵盐析法，离子交换层析法、凝胶层析法、超滤法等法精制卵黄免疫球蛋白，去除多余脂肪、色素等无关成分。

5、专利工艺去除外源病毒。

成品检验

1、效价测定；

2、细菌培养；

3、安全实验。

精制卵黄抗体应用原则

原则1：尽早使用

抗体可中和病原或毒素，但这种作用仅局限于未与组织细胞结合的病原或外毒素。因此，使用抗体治疗传染病，越早越好。

原则2：途径合理

针对不同疫病和用途采用不同途径，途径有注射、口服；急性发病时大多采用注射的途径，但在注射方法上，可皮下或肌肉注射，也可静脉注射，一般多采用皮下或肌肉注射，静脉注射作用虽快，但易引起过敏反应。预防时多采用口服。

原则3：用量足够

治疗传染病，作用快、效果好。但半衰期短( 同种动物3w，异种动物2w) ，有效维持时间一般只有2~3w。因此，必须足量注射，才能取得理想的效果。

原则4：防止发病

免疫血清如用异种动物制备，则具有抗原性,有引起血清病的可能。预防的主要措施是使用提纯的制品，并按照要求剂量使用，一次用量不可过大。

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