荧光曲线图(荧光曲线不光滑什么原因)

导语：荧光曲线异常太头疼？看了这篇文章你就懂啦

如果说科研的尽头是无休止的PCR，那么科研人的绝望一定是荧光曲线出现异常！每一次对着仪器绝望大喊：“跑的这是什么鬼曲线呀喂！”相信仪器也很无奈：“又不是老子配的体系，老子只负责跑啊菜狗！”荧光曲线出现问题不要慌，看看下面有没有你遇见的情况！

1.程序都跑完了，还是没有扩增曲线！这个问题可能是因为①模板浓度太低，导致不能检出。建议减少稀释的梯度或缩小梯度稀释的倍数。②循环数太少，还没等起峰呢，反应就已经结束了，所以建议把循环数设定在40-45较佳。③反应体系中某个成分失效，也会导致扩增不成功，这个问题解决起来比较麻烦，需要我们一个成分一个成分去检验。④你个科研小垃圾没有设置荧光采集步骤！注意荧光采集步骤一般会放在退火或延伸阶段哦！⑤还有另外一些科研小垃圾马马虎虎的体系成分加不全，出现漏加、错加的情况。为了自己的时间成本着想，要认认真真，心无旁骛的做实验哦！

2.个别扩增曲线骤降。这个问题就是典型的细节问题，如果体系混匀后没有消泡或者消泡不彻底，反应温度上升时会导致留存气泡破裂，荧光强度骤减，扩增曲线相应的也不会连贯好看啦！

3.扩增曲线不增反降。可能是因为模板浓度过高，基线期内起峰，导致仪器将扩增曲线往基线位置下拉，导致扩增曲线越跑越低，不妨试试减少基线期循环数，可能会取得不错的效果哦。

当然，以上所有的解决方法都建立在仪器没有出问题的基础上，要是尝试各种方法都解决不了，那么你就该物色物色新的PCR仪啦！实时荧光定量PCR仪，采用双通道双8孔模块设计，可实现一机多用，内嵌7英寸高清TFT彩色触摸显示屏，WIN10操作系统，自带分析软件。无需电脑即可完成定量分析和报告打印。小巧便携，性能优越，结果稳定，是您的不二选择呦！

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