土壤中氨基酸的测定(土壤有机氮的测定方法)

导语：土壤有机氮组分的测定（氨基酸态氮、氨基糖态氮、酸解铵态氮等）

今天给大家分享一下如何用酸水解-蒸馏法测定土壤中有机氮组分（氨基酸态氮、氨基糖态氮、酸解铵态氮、酸解总氮）。操作步骤如下:·

1)土壤水解液的制备:

称取适量过0.25mm筛的土壤样品，放入具有磨口接头的三角瓶中，加入2滴正辛醇和20ml和6ml的HCI，摇动瓶子使土壤和酸液充分混匀，将瓶子放入有温控功能的远红外消煮炉中，在瓶口装上有玻璃磨口接头的冷凝管，接通冷凝水，打开电源开关，使温度控制在120±3℃，在回流条件下使土壤--酸混合液慢慢沸腾12小时。

水解结束后，用中速蓝带滤纸将样品趁热过滤，滤液收集在100ml的烧杯中，用去离子水少量多次冲洗残渣，使滤液体积达到约6Oml。将盛有滤液的烧杯放在碎冰块中，借助PH计，逐滴慢慢加入5mol/L NaOH溶液，边加边搅拌，直到水解液的pH达5左右，再用

0.5mol/L的NaOH进行中和，使水解液的pH达6.5±0.1，用小漏斗把酸解液转移到I00ml容量瓶中，定容至刻度。

2)酸解液中氮素形态的测定

(1)酸解液全氮的测定:

取样前，先倒转容量瓶几次，使悬浮液均匀，并用末端较宽的移液管吸取5ml酸解液，放入消煮管中，加入0.5克定氮混合催化剂和2ml浓硫酸，380℃温度下消煮1.5小时。冷却后将消煮管连接到定氮仪上，加10ml 10mol/L NaOH，蒸馏约4分钟，流出液用硼酸吸收，蒸馏结束后用0.0055 mol/L H2SO4滴定。

(2)铵态氮的测定

取10ml已中和的酸水解液，放入消煮管中，加入2mL 3.5%的MgO悬浮液，立即连接蒸馏装置，蒸馏约2分钟后滴定。

(3)氨基糖态氮的测定

取已中和的酸水解液10ml于消煮管中，加入10ml磷酸一硼酸缓冲液(PH11.2)，连接蒸馏装置，蒸馏4分钟，滴定。此测定结果减去铵态氮，即为氨基糖态氮。

(4)氨基酸态氮的测定

取5ml已中和的酸水解液于消煮管中，加入1ml 0.5mol/L NaOH溶液，在沸水中加热直到溶液减至2-3ml，取出冷却，加入0.5g柠檬酸和0.1g茚三酮，将消煮管放回沸水浴中，加热1分钟后，旋转消煮管(不放开水浴)3分钟，再在水浴中保持9分钟，取出冷却后，加入10ml磷酸--硼酸缓冲液和1ml 5mol/L NaOH，蒸馏4分钟，滴定。

(5)未知态氮= 水解总氮- (铵态氮+氨基糖态氮+氨基酸态氮)

(6)非水解氮= 土壤总氮-水解液总氮

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