巨噬细胞吞噬功能检测方法(巨噬细胞吞噬功能检测原理)

导语：巨噬细胞吞噬功能检测——万融实验

【实验原理】

吞噬细胞包括单核巨噬细胞和中性粒细胞，具有对异物（如细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等）进行吞噬和消化的功能，在机体固有性免疫中发挥重要作用。小鼠腹腔内注射淀粉，可刺激巨噬细胞的聚集。3天后小鼠腹腔内注入鸡红细胞（抗原）悬液，1h后解剖收集腹腔巨噬细胞，染色、镜检可观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象。通过计算吞噬百分比或吞噬指数可测定吞噬细胞的吞噬功能。

【材料与仪器】

1. 小鼠、PBS缓冲液、8％淀粉溶液、5％鸡红细胞、瑞氏染液。

2. 剪刀、镊子、注射器、尖吸管及橡皮吸头、小试管、载玻片、普通光学显微镜、镜油、擦镜纸等。

【实验方法】

1. 实验准备：用无菌注射器吸取8％淀粉2ml，注射于小鼠腹腔内。

2.3天后，小鼠腹腔内注射5％鸡红细胞悬液2ml，让其活动1h。

2. 将小鼠用颈椎脱臼法处死，解剖暴露腹腔，于腹腔靠上部位，用镊子轻轻夹起腹膜，将腹膜剪一小口，用尖吸管注入2～3ml预温的PBS，同时用手反复揉搓腹腔约1～2min，以便尽可能多地冲洗出小鼠腹腔的巨噬细胞。4.用尖吸管吸取腹腔液，置一洁净试管内。5.用尖吸管将腹腔液吹打均匀（尽量避免产生气泡），取腹腔液涂片，自然干燥。6.瑞氏染色：瑞氏染液2～3滴，染1min，直接滴加蒸馏水6～8滴，染6min，以蒸馏水冲洗。吸水纸吸干，油镜下观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞现象。

【实验结果】观察到小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象（图3-1），计算吞噬百分比，即每100个吞噬细胞中吞噬有鸡红细胞的吞噬细胞数。也可用吞噬指数表示，即将100个吞噬细胞中所吞噬鸡红细胞的总数除以100。吞噬百分比和吞噬指数一般是平行的。

图3-1　巨噬细胞吞噬鸡红细胞现象

【思考题】

1. 实验前3天为何要在小鼠腹腔内注射2ml8％淀粉溶液？

2.你观察到的鸡红细胞形态有何特点？

本文内容由小信整理编辑！