聚丙烯酰胺凝胶电泳操作方法有哪些(聚丙烯酰胺凝胶电泳操作要点)

导语：聚丙烯酰胺凝胶电泳操作方法

聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作：首先在制胶前准备玻璃板、垂直平板支架的安装、密封好玻璃板。

1、先用洗涤剂将玻璃板反复清洗，再用清水冲洗干净，待玻璃板晾干后，将1mm塑料薄片沾少许清水，使其贴在玻璃板上，然后将另一块凹行玻璃板与原玻璃板紧贴。

2、再将贴好的玻璃板，放入垂直支架内，两侧用钢夹使其固定，钢夹的高度不要超过凹行玻璃的凹口处为宜，两侧选用力度对称、大小适中的钢夹。

3、用微波炉将1%琼脂糖加热融化后，倒入支架板底槽中，将其密封即可，然后用吸管吸取少量琼脂溶液，加入到玻璃板两边的缝隙内，将其密封，冷却凝固后备用。

用30%的丙烯酰胺溶液10ml；10ｘTBE溶液4ml；双蒸水16ml；20%的过硫酸铵（AP）200ul；TEMED溶液20ul配制PAGE凝胶。

把垂直支架倾斜30°，将配好的PAGE凝胶溶液沿凹形玻璃平口处缓缓倒入至距平口7mm处为宜，灌胶完成后，用枪吸取少量水密封胶口，压平胶面即可，后续可以开始点样电泳。

用微量移液器吸取1ul的溴酚蓝溶液，根据PCR产物量大小吸取适量样品，点入胶孔内即可。点样结束后，接通电源，调节电压至300V，90min，电泳时间根据PCR产物分子量适当延长。

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