免疫组织化学技术方法有几种其原理是什么(免疫组织化学技术原理)

导语：「攻略」免疫组织化学之组织处理

免疫组织化学（Immunohistochemistry，IHC）是表现抗原抗体反应的直观实验方法，主要用于定性反应，结合光密度等其他技术亦可实现半定量化。接下来的几个篇章将会和大家分享有关免疫组织化学实验的经验，包括组织处理，石蜡切片，免疫组化操作以及半定量分析。本章主要阐述在解剖完组织后做的预处理应该注意的几个要点：

1. 实验室安全管理

做IHC，根据最后一步的染色方法（此处介绍的是DAB染色法）的不同，会接触很多化学试剂，这些试剂中，有些是呼吸道吸入（大量）致癌，有些是皮肤接触伤害，因此对化学试剂的认识和安全管理尤为重要，以下试剂在接触过程中请一定根据试剂说明注意事项操作！

2.组织取材

在解剖取组织的过程中，需要注意「准确」、「快速」、「轻柔」、「低温」这几个要点。

3. 组织固定

IHC阳性结果的好坏（或者说是美观），很大程度上来自于切片质量的好坏；而石蜡切片（也可以是冰冻切片，此处以石蜡切片为例）的好坏，很大程度上则取决于组织的包埋处理；组织的包埋处理能否透明的好，很大程度上取决于组织的固定。由此可见组织固定对IHC的重要性。

4.组织处理

最关键的实施步骤当然是组织处理了，脱水化，透明化，石蜡化，每一步在细节上把握好，就必然能有较好的结果，导师常说，「在实验过程中，要把组织当做自己的老婆（公）」，只有尽心，方显成果。以下组织包埋的流程仅供参考，根据组织的大小，柔软程度，之前在福尔马林（或70%酒精）中浸泡的时间，等等这些因素的不同，包埋流程各试剂中需要停留的时间不一样。最好的参考标准是已经发表文献中使用的protocol，再加上自己实验室的探索，整理出适合自己实验室，自己课题对应组织所『专有』的protocol。

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