万级无菌实验室(实验室常用的简单的无菌操作流程)
导语:实验室无菌操作——万融实验
(1)无菌持物钳使用方法
1)无菌持物钳(镊)应浸泡在盛有消毒溶液的大口容器内,根据条件亦可使用干燥无菌持物钳(镊)。浸泡液要浸没钳轴关节以上2~3cm或镊子的1/2。每个容器只能放1把无菌持物钳(镊)。
2)取放无菌持物钳(镊)时,应将钳(镊)端闭合。取出时不可触及容器口缘及溶液面以上容器内壁。使用时应保持钳端向下。用后立即放回容器中,并松开关节将前端打开。
3)无菌持物钳(镊)只能用于夹取无菌物品,不能触碰未经消毒的物品。如有被污染或可疑污染时,应重新消毒。
(2)无菌包装打开的方法
1)取出无菌器皿时,先查看外包装上的名称及灭菌日期。
2)将其放在超净台内,解开线绳。
3)用无菌钳取出所需物品,放进超净台。如包装内物品一次用不完,则按原折痕包扎好,并注明开包时间,24小时后须重新灭菌。
(3)无菌容器的使用
1)打开无菌容器时,容器与盖子的接口处用75%酒精消毒,打开盖子,盖子的内面向上,平放于桌上,夹取所需物品后立即盖严。
2)手持无菌容器时(如无菌饭盒),应托住底部,不可触及容器的边缘或内面。
(4)取用无菌溶液:仔细检查核对溶液后,瓶口的边缘处过火焰灭菌,揭开瓶盖,以手夹住瓶盖并握住瓶身,手掌紧贴瓶签,倾斜约45°取用溶液。
若用加样器吸取或加入液体(细胞)时,吸头及加样器杆不能接触容器瓶口及内壁;若要倒出液体,可先倒出少许溶液冲净瓶口,再由原处倒出适量溶液于容器内。
倾倒溶液后瓶口及瓶盖再次过火焰灭菌,盖上瓶盖,并注明开瓶时间。
注意在分装试剂时应尽量小包装,以免反复打开而造成污染。
(5)接种
1)向培养板中加入细胞时,应边加边轻轻振荡细胞混悬液,使每孔加入的细胞量均匀。
2)加样时注意不要打出气泡。
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