大豆胰蛋白酶抑制因子测定方法(大豆胰蛋白酶抑制因子测定原理)
导语:大豆胰蛋白酶抑制因子测定
大豆胰蛋白酶抑制因子检测样本胰蛋白酶抑制因子测定的适用样品包括:初乳、豆豉、豆粕、大豆、大豆、蚕豆、红豆、绿豆、黄豆、黑豆、豇豆、豌豆、刀豆、扁豆、芸豆、鹰嘴豆、木豆,发酵豆粕、豆粕等豆制品。
为什么检测大豆胰蛋白酶抑制因子胰蛋白酶抑制因子是大豆中主要的抗营养因子,现在已经发现的胰蛋白酶抑制因子有7~10种。胰蛋白酶抑制剂在大豆中的含量为2%左右。其中KTI含量为1.4%左右。当动物采食未完全除去胰蛋白酶抑制因子的大豆饲料后,胰蛋白酶抑制因子一方面阻碍肠道内蛋白水解酶的作用而使蛋白质消化率下降,引起恶心、呕吐等肠胃中毒症状;另一方面胰蛋白酶抑制因子还作用于胰腺本身,发生补偿性反应,造成机能亢进,刺激胰腺分泌过多的胰腺酶,造成胰腺分泌的内源性必需氨基酸缺乏,引起消化吸收功能失调或紊乱,严重时出现腹泻,抑制机体生长和造成胰脏肿大等现象。
大豆胰蛋白酶抑制因子检测方法大豆胰蛋白酶抑制因子检测目前市场上主要是使用ELISA酶联免疫法检测,发酵豆粕中大豆胰蛋白酶抑制因子的测定,其原理是,胰蛋白酶可作用于底物苯甲酰一L-精氨酸对硝基苯胺(L-BAPA)结构中精氨酸与对硝基苯胺的连接键,释放出黄色的对硝基苯胺,该物质在410nm有最大吸收值。大豆及其产品中的大豆胰蛋白酶抑制因子可抑制这一反应,使吸光度值下降,其下降程度与胰蛋白酶抑制剂活性成正比。用分光光度法在410nm处测定吸光度值的变化,可对胰蛋白酶抑制剂活性进行定量分析
大豆胰蛋白酶抑制因子检测步骤大豆胰蛋白酶抑制因子检测是一个比较复杂的过程,这里就不详细介绍了,下次找一个时间详细的为大家介绍大豆胰蛋白酶抑制因子测定的详细步骤,今天为简单的介绍一下大豆胰蛋白酶抑制因子的步骤,主要分为9步1、提取 2、稀释 3、加样 4、洗板 5、加酶 6、洗板 7、显色 8、终止 9、计算
大豆胰蛋白酶抑制因子检测注意事项1、大豆胰蛋白酶抑制因子检测试剂盒提前取出复温2、样本粉碎到可以过60目筛,否则提取效率会降低3、样本和标准品需要做复孔,提高准确度4、移液器吸取不同试剂需要更换吸头,防止交叉污染。
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